PHÁT HIỆN KHÁNG THỂ DỊCH TẢ LỢN CHÂU PHI (ASF) BẰNG PP ELISA

1. Giới thiệu chung về bệnh: 
Dịch tả lợn châu Phi (ASF - African Swine Fever) là một bệnh lây nhiễm do virus ASFV gây ra. Đây là một loại virus AND thuộc họ Asfarviridae, thuộc giống Asfivirus. Trong tự nhiên, thời gian ủ bệnh thường kéo dài từ 4 đến 19 ngày.
Các chủng virus có độc lực cao gây ra xuất huyết bán cấp và cấp tính, đặc trưng bởi sốt cao, chán ăn, xuất huyết da và cơ quan nội tạng, thường gây tử vong trong vòng 4 đến 10 ngày, thậm chí đôi khi lợn chết trước khi xuất hiện triệu chứng lâm sàng. Những chủng có độc lực thấp hơn thường gây triệu chứng nhẹ như sốt nhẹ, chán ăn và mệt mỏi, dễ nhầm lẫn với các bệnh khác ở lợn.
Bệnh này có khả năng lây lan nhanh chóng và ảnh hưởng đến tất cả các loài lợn, bao gồm cả lợn nuôi và lợn hoang dã, ở mọi lứa tuổi. Tỷ lệ tử vong có thể đạt tới 100%, gây ra tổn thất nghiêm trọng. 2. Ý nghĩa của việc kiểm tra kháng thể ASFV:
a) Với những trại chưa tiêm phòng vắc xin ASFV: 
Kháng thể kháng ASFV xuất hiện sớm sau 7 – 10 ngày nhiễm bệnh. Đối với chủng độc lực cao, lợn thường chết trước khi hình thành kháng thể kháng ASFV. Những nơi có chủng nhược độc và chủng độc lực yếu lưu hành thì xét nghiệm huyết thanh học là cần thiết để xác định lợn đã phục hồi và bị nhiễm bệnh không có triệu chứng.
Kết quả kháng thể Dương tính ở lợn chưa tiêm phòng vắc xin được xác định là Lợn đang bị mắc bệnh Dịch tả lợn Châu Phi => Vì vậy việc định kỳ kiểm tra kháng thể ASFV trên đàn lợn là rất cần thiết.
b) Với những trại đã tiêm phòng vắc xin ASFV: 
Việc kiểm tra kháng thể sau khi tiêm phòng vắc xin ASFV là cần thiết để đánh giá được đáp ứng miễn dịch sau khi sử dụng vắc xin có tốt hay không, kháng thể có đạt bảo hộ không, độ đồng đều kháng thể trong đàn,… Thông qua đó đánh giá được Chất lượng vắc xin sử dụng, kỹ thuật tiêm vắc xin,…
3.Phát hiện kháng thể ASFV bằng phương pháp ELISA: 
Hiện nay có nhiều bộ kít ELISA phát hiện kháng thể ASFV bán sẵn trên thị trường. Khi sử dụng phương pháp ELISA cần theo đúng hướng dẫn của nhà sản xuất.
a) Nguyên lý chung của phương pháp ELISA
ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent assay) là một kỹ thuật sinh hóa được sử dụng phổ biến trong lĩnh vực miễn dịch học để xác định sự hiện diện của kháng nguyên hoặc kháng thể trong mẫu thử.
Nguyên tắc hoạt động của phương pháp ELISA dựa trên tính chất đặc hiệu của sự tương tác giữa kháng nguyên và kháng thể. Quá trình thực hiện cơ bản bao gồm các bước sau:
- Kháng nguyên (antigen) hoặc kháng thể (antibody) đã được xác định trước sẽ được cố định trên một bề mặt rắn.
- Sau đó cho mẫu có chứa kháng thể - antibody (KT) hoặc kháng nguyên (KN) cần tìm vào giếng.
- Bổ sung thêm kháng thể có gắn với ezyme.
- Bước cuối cùng thêm cơ chất (substance), enzyme sẽ thuỷ phân làm biến đổi cơ chất này và tạo tín hiệu màu có thể xác định được bằng máy đo huỳnh quang.
b) Các loại phản ứng ELISA